Metronidazolo ELISA Antibody Fast Detection Kit per miele 96 Wells/Kit Sensitivity 0,05 Ppb

Metronidazolo ELISA Test Kit per miele 96 Wells/Kit Sensitivity 0,05 ppb

 

1. Principio

Questo corredo della prova è basato sull'immunotest enzimatico competitivo per la rilevazione del metronidazolo nel campione. Gli antigeni di coppia sono ricoperti prima sulle bande micro--bene. Il metronidazolo nel campione e gli antigeni di coppia ricoperti prima sulle bande micro--bene competono per gli anticorpi anti- del metronidazolo. Dopo che l'aggiunta del coniugato degli enzimi, il substrato di TMB si aggiunge per colorazione. Il valore di densità ottica (OD) del campione ha una correlazione negativa con il metronidazolo in. Questo valore è confrontato alla curva standard e la concentrazione nel metronidazolo successivamente è ottenuta.

2. Caratteristiche tecniche

Sensibilità: 0.05ppb
Limite di segnalazione
Miele: circa 0.1ppb
Nota: ng/ml del ppb= o ng/g

Tasso di reazione crociata:
Metronidazolo 100%
Ornidazole 83%
Secnidazole 110%
Dimetridazolo <1> dell'Metronidazolo-OH <1> Tinidazole <1>

Tasso di recupero: 90±30%
 

3. Componenti

 

1	Strisce micro--bene	12 strisce con 8 smontabili pozzi ciascuno
2	6× soluzione tipo (1mL ciascuno)	0 ppb	0,05 ppb
		0,15 ppb	0,45 ppb
		ppb 1,35	ppb 4,05
3	Coniugato degli enzimi	12 ml	spiritello malevolo
4	Soluzione di lavoro dell'anticorpo	7 ml	cappuccio blu
5	Substrato A	7 ml	cappuccio bianco
6	SubstrateB	7 ml	berretto nero
7	Fermi la soluzione	7 ml	cappuccio giallo
8	20× ha concentrato lavare l'amplificatore	30 ml	cappuccio bianco
9	Ridissoluzione della soluzione	50 ml	cappuccio trasparente

 

4. Materiali richiesti ma non forniti

1) Attrezzature: il lettore del microplate (450nm, 630nm), la stampante, il dispositivo dell'azoto-essiccazione, il vortice, l'agitatore, centrifuga (3000g e sopra), misurante pipetta, equilibrio (una sensibilità reciproca di 0,01 g), incubatrice (4℃, 25℃), bagno d'acqua, temporizzatore;
2) Micropipettors: µL 20-200 µL ad un solo canale, 100-1000 e µl di otto-Manica 30~300;
3) reagenti (AR): Na2HPO412H2O▪, NaH2PO4·2H2O, acetato di etile, esano, acqua deionizzata.

5. Pretrattamento del campione

Istruzioni
I seguenti punti devono occuparsi prima del pretrattamento affatto del genere di campione:
1) soltanto le punte eliminabili possono essere usate per gli esperimenti e le punte devono essere cambiate una volta usate per l'assorbimento dei reagenti differenti;
2) prima dell'esperimento, ogni attrezzatura sperimentale deve essere pulita e dovrebbe ri-essere pulita se necessario, per evitare la contaminazione che interferisce con i risultati sperimentali.

Preparazione della soluzione prima di pretrattamento del campione:
1) lavare amplificatore: 1 parte 20× ha concentrato lavare l'amplificatore + 19 parti di acqua deionizzata.
2) amplificatore di 0.2M Phosphate: pesi 25.8g Na2HPO412H2O▪, 4.350g NaH2PO4·2H2O, aggiungono 500ml hanno deionizzato l'acqua per dissolversi completamente.
 

5,1 preparazione del campione
Miele
1) pesa il campione del miele di 2.0± 0.05g nel tubo centrifugo di plastica 50ml;
2) aggiunge l'amplificatore di 2ml 0.2M Phosphate, poi aggiunge l'acetato di etile 8ml, scuote forte per 5min (o usi il vortice per 3min) per stabilire il contatto del campione con la fase organica completamente;
3) centrifuga superiore a 3000 g alla temperatura ambiente per 5min;
4) liquido di su-strato di trasferimento 4ml chiaro nel tubo centrifugo 5ml (nota: non richieda la fase dell'acqua di giù-strato), colpo per asciugarsi in bagno d'acqua 50-60℃;
5) aggiunge l'esano 1ml e 0.5ml che ridissolvono di conseguenza la soluzione, scuote forte per 2min (o usi il vortice per 1min);
6) centrifuga superiore a 3000 g alla temperatura ambiente per 5min;
7) la fase organica di su-strato di scarto, prende il liquido di giù-strato 50ul per provare.
Popolare di diluizione del campione: 0,5

6. Procedure di ELISA

6,1 istruzioni
1) porta tutti i reagenti e strisce micro--bene alla temperatura ambiente (℃ 20-25) prima dell'uso;
2) ritorno tutti i reagenti a ℃ 2-8 subito dopo di uso;
3) la riproducibilità dell'analisi di ELISA, in larga misura, dipende dalla consistenza del lavaggio del piatto. L'operazione corretta di lavare del piatto è il punto chiave in ELISA le procedure;
4) per l'incubazione alle temperature costanti, tutti i campioni e reagenti devono evitare l'esposizione alla luce ed ogni microplate dovrebbe essere sigillato dalla membrana della copertura.

6,2 procedure di operazione
1. porti il corredo della prova alla temperatura ambiente (℃ 20-25) per almeno il min 30, notano che ogni reagente deve essere scosso per mescolarsi uniformemente prima dell'uso, mettono le strisce micro--bene richieste nelle strutture del piatto. Ha risigillato il microplate inutilizzato, deposito a ℃ 2-8, non congelato.
2. numerazione: numero i micro-pozzi secondo i campioni e la soluzione tipo; ogni campione e soluzione tipo dovrebbero essere eseguiti due volte, registrano le loro posizioni.
3. aggiunga il µL 50 del campione o della soluzione tipo nei pozzi duplicati separati; poi aggiunga delicatamente 50 il µL della soluzione di lavoro dell'anticorpo in ogni pozzo, miscela scuotendo il piatto manualmente. Sigilli il microplate con la membrana della copertura ed incubi a ℃ 4 per 60min nello scuro.
4. versi liquido da microwell, aggiunga 250 µL/well di lavare l'amplificatore per lavare il microplate per 15-30 s, poi versi lavare l'amplificatore da microwell, aggiunga lavare l'amplificatore per lavare in questo modo per 3-4 volte, poi prenda fuori ed agiti per asciugarsi con carta assorbente.
5. aggiunga il coniugato degli enzimi 100ul (non metta il microplate alla temperatura ambiente per molto tempo dopo avere lavato il punto per evitare la siccità del cavo del microplate alla differenza del risultato), miscela delicatamente scuotendo il piatto manualmente. Sigilli il microplate con la membrana della copertura ed incubi a ℃ 25 per 20min nello scuro. Lavaggio come punto 4.
6. colorazione: aggiunga la miscela 100ul della soluzione del substrato A e della soluzione del substrato B in ogni pozzo (nota: la soluzione del substrato A della miscela e la soluzione del substrato B al 1:1, utilizzano la miscela in 10min, non usano il metallo per contenere o mescolare, evitare il substrato invalido). Mescoli delicatamente scuotendo il piatto manualmente, guarnizione che il microplate con la membrana della copertura poi incuba a ℃ 25 per il min 15 a buio per colorazione.
7. determinazione: aggiunga 50 che il µL del ferma la soluzione in ogni pozzo. Mescoli delicatamente scuotendo il piatto manualmente. Fermata con successo quando colore del substrato dal blu da ingiallire. Raccomandi di leggere il valore del OD alla doppio-lunghezza d'onda 450/630 di nanometro in 5 minuti.

 

7. Giudizio di risultato

Ci sono due metodi per giudicare i risultati: quello primo è il giudizio approssimativo, mentre il secondo è la determinazione quantitativa. Nota che il valore del OD del campione ha una correlazione negativa con la concentrazione nel metronidazolo.

7,1 determinazione qualitativa
La gamma di concentrazione (ng/ml) di metronidazolo può essere ottenuta dal paragonare il valore medio del OD del campione a quello della soluzione tipo. Presupporre che il valore del OD del campioneⅠ sia 0,3 e quello del Ⅱ del campione è 1,0, il valore del OD delle soluzioni tipo è: 2,243 per 0ppb, 1,816 per 0.05ppb, 1,415 per 0.15ppb, 0,74 per 0.45ppb, 0,313 per 1.35ppb, 0,155 per 4.05ppb, la gamma di concentrazione del Ⅰ del campione sono di conseguenza 1,35 a 4.05ppb e quello del Ⅱ del campione è 0,05 a 0.45ppb.

7,2 determinazione quantitativa
I valori medi dei valori di capacità di assorbimento è ottenuto per il valore medio del OD (B) del campione e della soluzione tipo divisi dal valore del OD (B0) della prima soluzione tipo (0 standard) e successivamente moltiplicati per 100%, cioè,

 

Percentuale di valore di capacità di assorbimento =	B	×100%
	B0

 

Valore del OD di media di B-the del campione o della soluzione tipo
Valore del OD di media di B0-the delle 0 soluzioni tipo di ng/ml
Disegni la curva standard con le percentuali di assorbimento della soluzione tipo ed i valori del semilogarithm della soluzione tipo del metronidazolo (ng/ml) come y e ascissa, rispettivamente. Legga la concentrazione corrispondente del campione dalla curva standard comprendendo la sua percentuale di assorbimento nella curva standard. Il valore risultante successivamente è moltiplicato per il popolare corrispondente di diluizione, infine ottenente la concentrazione nel metronidazolo nel campione.
Facendo uso dell'analizzando il software professionale di questo corredo sarà più conveniente per l'analisi precisa e rapida di un gran numero di campioni. (Contattici per favore per questo software).

8. Precauzioni

1. La temperatura ambiente inferiore a ℃ 25 o la temperatura dei reagenti e dei campioni che non sono rinviati alla temperatura ambiente (℃ 20-25) condurrà ad un valore standard più basso del OD.
2. la siccità del microplate nel processo di lavaggio sarà accompagnata dalle situazioni compreso le curve standard non lineari e la riproducibilità indesiderabile; Così continui al punto seguente subito dopo del lavaggio.
3. la miscela uniformemente, altrimenti là sarà la riproducibilità indesiderabile.
4. La soluzione di arresto è la soluzione acida solforica da 2 m., evita contattare con la pelle.
5. Non usi il corredo che supera la sua data di scadenza. L'uso dei reagenti diluiti o adulterati dai corredi condurrà ai cambiamenti nella sensibilità e nei valori di rilevazione del OD. Non scambi i reagenti dai corredi dei lotti differenti per usare.
6. metta il microplate inutilizzato in una borsa di automatico-sigillamento per risigillarlo. La soluzione tipo ed il colore incolore precedenti è sensibili alla luce e non possono direttamente essere esposte così alla luce.
7. scarti la soluzione di colorazione con tutto il colore che indica la degenerazione di questa soluzione. Il valore di rilevazione della soluzione tipo 1 (0 ppb) di meno di 0,5 indica la sua degenerazione.

9. Data di scadenza e di stoccaggio

Stoccaggio: deposito a ℃ 2-8, non congelato.
Data di scadenza: 12 mesi; la data di produzione è sulla scatola.

 

 

 

 

 

 

Q1: Quando sarà spedito?
A1: Spediremo appena possibile le merci per voi entro 7 giorni lavorativi dopo la ricezione del pagamento. (Nel caso dei fattori esterni quale l'epidemia, la consegna può essere ritardata)

 

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