Phenylethanolamine un siero di ELISA Test Kit For Milk Egg Urine alimenta 96 pozzi/corredo

Phenylethanolamine un siero dell'urina dell'uovo di ELISA Test Kit For Milk alimenta 96 pozzi/corredo

 

1. Principio

Il corredo della prova è basato sull'immunotest enzimatico competitivo per la rilevazione di Phenylethanolamine A nel campione. L'antigene coniugato è ricoperto prima sulle bande micro--bene. Il Phenylethanolamine A nel campione e gli antigeni di coppia ricoperti prima sulle bande micro--bene competono per gli anticorpi anti- di Phenylethanolamine A. Dopo che l'aggiunta del coniugato degli enzimi, il substrato di TMB si aggiunge per colorazione. Il valore di densità ottica (OD) del campione ha una correlazione negativa con la concentrazione di Phenylethanolamine A nel campione. Il valore è confrontato alla curva standard e la concentrazione di Phenylethanolamine A successivamente è ottenuta.

 

2. Caratteristiche tecniche

Sensibilità: 0,1 ppb
Temperatura dell'incubatrice: 25℃
Tempo dell'incubatrice: 30min~15min

Limite di segnalazione
Ppb del tessuto 0,2
Alimenti 0,5 ppb

Reazioni crociate:
Phenylethanolamine A 100%
Tasso <1> di recupero <1> di clenbuterolo <1> di salbutamolo di Ractopamine
Tessuto, alimentazione 85±25%

 

3. Componenti

 

1	Strisce micro--bene	12 strisce con 8 smontabili pozzi ciascuno
2	6× soluzione tipo (1mL ciascuno)	0ppb	0.1ppb
		0.3ppb	0.9ppb
		2.7ppb	8.1ppb
3	Coniugato degli enzimi	7ml	spiritello malevolo
4	Soluzione di lavoro dell'anticorpo	7ml	cappuccio blu
5	Substrato A	7ml	cappuccio bianco
6	SubstrateB	7ml	berretto nero
7	Fermi la soluzione	7ml	cappuccio giallo
8	20× ha concentrato lavare l'amplificatore	40ml	cappuccio bianco
9	2× ha concentrato la ridissoluzione della soluzione	50ml	cappuccio trasparente

 

4. Materiali richiesti ma non forniti

1) Attrezzature: il lettore del microplate, lo stampatore, l'omogeneizzatore, il dispositivo dell'azoto-essiccazione, l'oscillatore, centrifuga, misurante pipetta, equilibrio (una sensibilità reciproca di 0,01 g), incubatrice.
2) Micropipettors: µL 20-200 µL ad un solo canale e 100-1000 e µL multicanale 30-300;
3) reagenti: Acetato di etile, n-esano, acido acetico glaciale

 

5. Pretrattamento del campione

Istruzioni (i seguenti punti devono occuparsi prima del pretrattamento)
1) soltanto le punte eliminabili possono essere usate per gli esperimenti e le punte devono essere cambiate una volta usate per l'assorbimento dei reagenti differenti;
2) prima dell'esperimento, ogni utensile sperimentale deve essere pulito e dovrebbe ri-essere pulito se necessario, per evitare la contaminazione che interferisce con i risultati sperimentali.

Preparazione della soluzione prima di pretrattamento del campione:
1) campione che estrae soluzione: prenda l'acetato di etile 99ml, aggiunga 1 ml di acido acetico glaciale e mescolilo bene.
2) campione che ridissolve soluzione: il 2×concentrated che ridissolve la soluzione è diluito con acqua deionizzata al 1:1 (1mL ha concentrato la ridissoluzione la soluzione + dell'acqua deionizzata 1mL), usato per la ridissoluzione del campione.

Preparazione dei campioni
5,1 alimentazione
1. il campione di frantumazione, prende 1.0±0.05g in un tubo centrifugo 50ml;
2. aggiunga un campione da 10 ml che estrae la soluzione, scossa con l'oscillatore per il min 3;
3. centrifuga a 4000 r/min alla temperatura ambiente per il min 10;
4. prenda un surnatante, un colpo per asciugarsi con azoto o un'aria da 2 ml a ℃ 50-60;
5. aggiunga 1 ml di n-esano, quindi aggiunga il campione 1ml che ridissolve la soluzione, scossa per 30s;
6. la centrifuga a 4000 r/min alla temperatura ambiente per il min 10, rimuove la fase organica di su-strato.
7. prenda uno giù-strato di 20 µL per l'analisi.
Popolare di diluizione del campione: 5
(Poiché c'è perturbazione del campione, recommend2PPB come valore TAGLIATO campione. )

5,2 tessuto
campione di tessuto omogeneo 1.Take 2.0±0.05g in un tubo centrifugo 50ml;
2.Add un campione da 8 ml che estrae soluzione, scossa con l'oscillatore per il min 2;
3.Centrifuge a 4000 r/min alla temperatura ambiente per il min 10;
4.Take un surnatante, un colpo da asciugarsi con azoto o un'aria da 2 ml a 50-60℃;
5.Add 1 ml di n-esano, quindi aggiungono il campione 1ml che ridissolve la soluzione, scossa per 30s;
6.Centrifuge a 4000 r/min alla temperatura ambiente per il min 10, rimuovono la fase organica di su-strato.
giù-strato del µL 7.Take 20 per analisi.
Popolare di diluizione del campione: 2
(Poiché c'è perturbazione del campione, recommend1PPB come valore TAGLIATO campione. )

 

6. Procedure di ELISA

6.1Instructions
1. porti tutti i reagenti e strisce micro--bene alla temperatura ambiente (℃ 20-25) prima dell'uso.
2. ritorno tutti i reagenti a ℃ 2-8 subito dopo di uso.
3. La riproducibilità dell'analisi di ELISA, in larga misura, dipende dalla consistenza del lavaggio del piatto. L'operazione corretta del lavaggio del piatto è i punti chiave nelle procedure dell'ELISA.
4. Per l'incubazione alle temperature costanti, tutti i campioni e reagenti devono evitare l'esposizione alla luce ed ogni microplate dovrebbe essere sigillato dalla membrana della copertura.

procedure 6.2Operation
1. porti il corredo della prova alla temperatura ambiente (℃ 20-25) per almeno 30 il min, nota che ogni reagente liquido deve essere scosso per mescolarsi uniformemente prima dell'uso.
2. preparazione della soluzione: Diluisca l'amplificatore di lavaggio concentrato 20× 40ml con acqua deionizzata al 1:19 (amplificatore di lavaggio concentrato 20× di 1 parte + 19 parti di acqua deionizzata), o prepari come quantità stata necessaria.
3. metta le strisce micro--bene richieste nelle strutture del piatto. Ha risigillato il microplate inutilizzato, memorizzato a ℃ 2-8, non congelato.
4. numerazione: numero i micro-pozzi secondo i campioni e la soluzione tipo; ogni campione e soluzione tipo dovrebbero essere eseguiti due volte; registri le loro posizioni.
5. aggiunga il µL 50 del campione o la soluzione tipo nei pozzi duplicati separati; aggiunga il µL 50 del coniugato degli enzimi, quindi aggiunga 50 il µL della soluzione di lavoro dell'anticorpo in ogni pozzo, guarnizione il microplate con la membrana della copertura, andincubate a ℃ 25 per 30 min.
6. versi liquido da microwell, falda per asciugarsi su carta assorbente; aggiunga 250 µL/well dell'acqua deionizzata, lavi per 15-30 secondi, poi elimini ed agiti per asciugarsi con carta assorbente, ripeti 4-5 volte.
7. colorazione: aggiunga 50 il µL della soluzione del substrato A, il µL 50 della soluzione di B in ogni pozzo. Mescoli delicatamente scuotendo il piatto manualmente ed incubi 25 al min del ℃ for15 a buio per colorazione.
8. determinazione: aggiunga 50 che il µL del ferma la soluzione in ogni pozzo. Mescoli delicatamente scuotendo il piatto manualmente. Fissi la lunghezza d'onda del lettore del microplate a 450 nanometro per determinare il valore del OD di ogni pozzo. (Raccomandi di leggere il valore del OD alla doppio-lunghezza d'onda 450/630 di nanometro nel min 5).

 

7. Giudizio di risultato

Ci sono due metodi per giudicare i risultati; quello primo è il giudizio approssimativo, mentre il secondo è la determinazione quantitativa. Nota che il valore del OD del campione ha una correlazione negativa con il Phenylethanolamine A nel campione.

7,1 determinazione qualitativa
La gamma di concentrazione (ng/ml) può essere forma ottenuta che paragona il valore medio del OD del campione a quella della soluzione tipo. Presupporre che il valore del OD del campioneⅠ sia 0,3 e quello del Ⅱ del campione è 1,0, il valore del OD delle soluzioni tipo è: 2,243 per 0ppb, 1,866 per 0.1ppb, 1,415 per 0.3ppb, 0,864 per 0.9ppb, 0,413 per 2.7ppb, 0,155 per 8.1ppb, la gamma di concentrazione del Ⅰ del campione sono di conseguenza 0,3 a 0.9ppb e quello del Ⅱ del campione è 2.7ppb a 8.1ppb.

7,2 determinazione quantitativa
I valori medi dei valori di capacità di assorbimento ottenuti per il valore medio del OD (B) del campione e della soluzione tipo divisi dal valore del OD (B0) della prima soluzione tipo (0 standard) e successivamente moltiplicati per 100%, quello è

 

Percentuale di valore di capacità di assorbimento =	B	×100%
	B0

 

Valore del OD di media di B-the del campione o della soluzione tipo
Valore del OD di media di B0-the delle 0 soluzioni tipo di ng/ml
Disegni la curva standard con le percentuali di assorbimento delle soluzioni tipo ed i valori del semilogarithm delle soluzioni tipo di Phenylethanolamine A (ng/ml) come y e ascissa, rispettivamente. Legga la concentrazione corrispondente del campione dalla curva standard comprendendo la sua percentuale di assorbimento nella curva standard. Il valore risultante successivamente è moltiplicato per il popolare corrispondente di diluizione, infine ottenente la concentrazione reale di Phenylethanolamine A nel campione.
Facendo uso dell'analizzando il software professionale di questo corredo sarà più conveniente per l'analisi precisa e rapida di un gran numero di campioni. (Contattici per favore per questo software)

8. Precauzioni

1. La temperatura ambiente inferiore a ℃ 25 o la temperatura dei reagenti e dei campioni che non sono rinviati alla temperatura ambiente (℃ 20-25) condurrà ad un valore standard più basso del OD.
2. la siccità del microplate nel processo di lavaggio sarà accompagnata dalle situazioni compreso le curve standard non lineari e la riproducibilità indesiderabile; Così continui al punto seguente subito dopo del lavaggio.
3. la miscela uniformemente, piatto del lavaggio completamente, la riproducibilità dell'analisi di ELISA, in larga misura, dipende dalla consistenza del lavaggio del piatto.
4. Fermi la soluzione è la soluzione acida solforica da 2 m., evitano contattare con la pelle.
5. Non usi il corredo che supera la sua data di scadenza. L'uso dei reagenti diluiti o adulterati dai corredi condurrà ai cambiamenti nella sensibilità e nei valori di rilevazione del OD. Non scambi i reagenti dai corredi dei numeri di lotto differenti per usare.
6. metta il microplate inutilizzato in una borsa di automatico-sigillamento per risigillarlo. La sostanza tipo ed il colore incolore precedenti è sensibili alla luce e non possono direttamente essere esposte così alla luce.
7. scarti la soluzione di colorazione con tutto il colore che indica la degenerazione di questa soluzione. Il valore di rilevazione dei 0 solutin di norma di meno di 0,5 (A450 nanometro< 0=""> 8. La temperatura ottimale della reazione è ℃ 25 e troppo alto o basse temperature provocherà i cambiamenti nella sensibilità individuare e nei valori del OD.

9. Data di scadenza e di stoccaggio

Stoccaggio: deposito a ℃ 2-8, non congelato.
Data di scadenza: 12 mesi; la data di produzione è sulla scatola.
Nota: Se l'imballaggio sotto vuoto di microplate ha perdita, è ancora valido usare, non colpisce il risultato dei test, è di rilassarsi per usare.

 

 

 

 

 

Q1: Quando sarà spedito?
A1: Spediremo appena possibile le merci per voi entro 7 giorni lavorativi dopo la ricezione del pagamento. (Nel caso dei fattori esterni quale l'epidemia, la consegna può essere ritardata)

 

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