La carne di maiale 96 del pollo della prova del siero di Beta Agonist ELISA Kit For Milk Egg Urine scaturisce/corredo

La carne di maiale 96 del pollo del siero di Beta Agonist ELISA Kit For Milk Egg Urine scaturisce/corredo

 

1. Principio

Gli β-agonisti provano il corredo è basato sull'immunotest enzimatico competitivo per la rilevazione degli β-agonisti nel campione. L'antigene di coppia è ricoperto prima sulle bande micro--bene. Gli β-agonisti nel campione e negli antigeni di coppia ricoperti prima sulle bande micro--bene competono per gli anticorpi degli anti-β-agonisti. Dopo che l'aggiunta del coniugato degli enzimi, il substrato di TMB si aggiunge per colorazione. Il valore di densità ottica (OD) del campione ha una correlazione negativa con gli β-agonisti nel campione. Questo valore è confrontato alla curva standard ed i residui degli β-agonisti successivamente è ottenuto.

 

2. Caratteristiche tecniche

Sensibilità: 0,1 ppb
Temperatura di incubazione: 25℃
Tempo di incubazione: 30min~15min

Limite di segnalazione:
Urina porcina 0.3ppb
Carne di maiale 0.6ppb

Tasso di reazione crociata: Clenbuterolo 100%, Cimaterol <4>

Tasso di recupero:
Urina porcina, carne di maiale 90%±30%

 

3. Componenti

 

1	Strisce micro--bene	12 strisce con 8 smontabili pozzi ciascuno
2	6× soluzione tipo (1 ml ciascuno)	0ppb	0.1ppb
		0.3ppb	0.9ppb
		2.7ppb	8.1ppb
3	Coniugato degli enzimi	7ml	spiritello malevolo
4	Soluzione di lavoro dell'anticorpo	10ml	cappuccio blu
5	Substrato A	7ml	cappuccio bianco
6	SubstrateB	7ml	berretto nero
7	Fermi la soluzione	7ml	cappuccio giallo
8	20× ha concentrato lavare l'amplificatore	40ml	cappuccio bianco
9	campione 5× che estrae soluzione	50ml	cappuccio trasparente

 

4. Materiali richiesti ma non forniti

1) Attrezzature: il lettore del microplate, lo stampatore, l'omogeneizzatore, il vortice, l'oscillatore, la centrifuga, incubatrice, misurante pipetta, equilibrio (una sensibilità reciproca di 0,01 g)
2) Micropipettors: 20-200µL ad un solo canale, 100-1000µL e 30-300µL multicanale;
3) reagenti: NaOH, HCI.

 

5. Pretrattamento del campione

Istruzioni (i seguenti punti devono occuparsi prima del pretrattamento)
1) soltanto le punte eliminabili possono essere usate per gli esperimenti e le punte devono essere cambiate una volta usate per l'assorbimento dei reagenti differenti;
2) prima dell'esperimento, ogni utensile sperimentale deve essere pulito e dovrebbe ri-essere pulito se necessario, per evitare la contaminazione che interferisce con i risultati sperimentali.

Preparazione della soluzione prima di pretrattamento del campione:
1) 0.2M HCI: dissolva 17.2mL HCI in acqua deionizzata a 1L.
2) NaOH di 1M: dissolva il NaOH 4g in acqua deionizzata a 100 ml.
3) campione che estrae soluzione: un campione di 1 parte 5X che estrae la soluzione + 4 parti ha deionizzato uniformemente l'acqua, miscela.

5,1 urina porcina
Prenda a 20 il µL chiara urina, direttamente individuilo (se l'urina è fangosa, deve filtrare o centrifuga a 4000 r/min per il min 10, poi prendono chiara urina). Deposito all'ambiente congelato se non usi.
Popolare di diluizione del campione: 1

5,2 carne di maiale
1. pesi 2±0.05g ha omogeneizzato il campione di tessuto in un tubo centrifugo 50ml, aggiungono 3ml 0.2M HCl, scossa per 3 min.
2. Poi aggiunga la soluzione del NaOH di 600ul 1M ed il campione 2.4ml che estraggono la soluzione, la scossa per 3min, centrifuga a 4000 r/min alla temperatura ambiente (℃ 20-25) per 10 min.
3. prenda il liquido di su-strato 20µL per l'analisi. (Nota: se c'è strato grasso dopo la centrifuga, rimuova lo strato grasso o lo strato grasso separato, prende il chiaro liquido per l'analisi)
Popolare di diluizione del campione: 4

 

6. Procedure di ELISA

6.1Instructions
1. porti tutti i reagenti e strisce micro--bene alla temperatura ambiente (℃ 20-25) prima dell'uso;
2. ritorno tutti i reagenti a ℃ 2-8 subito dopo di uso;
3. La riproducibilità dell'analisi di ELISA, in larga misura, dipende dalla consistenza del lavaggio del piatto. L'operazione corretta di lavare del piatto è il punto chiave in ELISA le procedure;
4. Per l'incubazione alle temperature costanti, tutti i campioni e reagenti devono evitare l'esposizione alla luce ed ogni microplate dovrebbe essere sigillato dalla membrana della copertura.

procedure 6.2Operation
1. porti il corredo della prova alla temperatura ambiente (℃ 20-25) per almeno il min 30, notano che ogni reagente deve essere scosso uniformemente prima dell'uso;
2. metta le strisce micro--bene richieste nelle strutture del piatto. Ha risigillato il microplate inutilizzato, memorizzato a ℃ 2-8, non congelato.
3. diluisca l'amplificatore di lavaggio concentrato 20X 40ml al 1:19 con acqua deionizzata (1 parte 20X concentrata lavando amplificatore + acqua deionizzata 19 parti). O prepari come quantità stata necessaria.
4. numerazione: numero i micro-pozzi secondo i campioni e la soluzione tipo; ogni campione e soluzione tipo dovrebbero essere eseguiti due volte; registri le loro posizioni.
5. aggiunga 20µL del campione o della soluzione tipo nei pozzi duplicati separati, quindi aggiunga il coniugato degli enzimi, 50ul/well; poi aggiunga la soluzione di lavoro dell'anticorpo, 80µL/well. Mescoli delicatamente scuotendo il piatto manualmente, guarnizione il microplate con la membrana della copertura, incubi a ℃ 25 per 30 min.
6. versi liquido da microwell, aggiunga 250µL/well di lavare l'amplificatore, lavaggio per 4-5 volte, 15-30s ogni volta, quindi elimini ed agiti per asciugarsi con carta assorbente (se ci sono le bolle dopo sbattimento, le tagliano con le punte pulite).
7. colorazione: aggiunga 50µL del substrato A, quindi aggiunga 50µL il substrato B in ogni pozzo. Mescoli delicatamente scuotendo il piatto manualmente ed incubi a ℃ 25 per minin 15 lo scuro per colorazione.
8. determinazione: aggiunga 50µL del fermano la soluzione in ogni pozzo. Mescoli delicatamente scuotendo il piatto manualmente. Fissi la lunghezza d'onda del lettore del microplate a 450nm per determinare il valore del OD di ogni pozzo. (Raccomandi di leggere il valore del OD alla doppio-lunghezza d'onda 450/630nm nel min 5).

 

7. Giudizio di risultato

Ci sono due metodi per giudicare i risultati; quello primo è il giudizio approssimativo, mentre il secondo è la determinazione quantitativa. Nota che il valore del OD del campione ha una correlazione negativa con concentrazione negli β-agonisti nel campione.

7,1 determinazione qualitativa
La gamma di concentrazione (ng/ml) ottenuta dal paragonare il valore medio del OD del campione a quello della soluzione tipo. Presupporre che il valore del OD del campioneⅠ sia 0,3 e quello del Ⅱ del campione è 1,0, il valore del OD delle soluzioni tipo è: 2,243 per 0ppb, 1,816 per 0.1ppb, 1,415 per 0.3ppb, 0,74 per 0.9ppb, 0,313 per 2.7ppb, 0,155 per 8.1ppb, la gamma di concentrazione del Ⅰ del campione sono di conseguenza 2,7 a 8.1ppb e quello del Ⅱ del campione è 0,3 a 0.9ppb.

7,2 determinazione quantitativa
I valori medi dei valori di capacità di assorbimento ottenuti per il valore medio del OD (B) del campione e della soluzione tipo divisi dal valore del OD (B0) della prima soluzione tipo (0 standard) e successivamente moltiplicati per 100%, quello è

 

Percentuale di valore di capacità di assorbimento =	B	×100%
	B0

 

Valore del OD di media di B-the (doppi pozzi) del campione o della soluzione tipo
Valore del OD di media di B0-the delle 0 soluzioni tipo di ng/ml
Disegni la curva standard con le percentuali di assorbimento delle soluzioni tipo ed i valori del semilogarithm delle soluzioni tipo degli β-agonisti (ng/ml) come y e ascissa, rispettivamente. Legga la concentrazione corrispondente del campione dalla curva standard comprendendo la sua percentuale di assorbimento nella curva standard. Il valore risultante successivamente è moltiplicato per il popolare di diluizione, infine ottenente la concentrazione negli β-agonisti nel campione.

 

8. Precauzioni

la temperatura ambiente 1.The inferiore a ℃ 25 o la temperatura dei reagenti e dei campioni che non sono rinviati alla temperatura ambiente (℃ 20-25) condurrà ad un valore standard più basso del OD.
2.Dryness del microplate nel processo di lavaggio sarà accompagnato dalle situazioni compreso le curve standard non lineari e la riproducibilità indesiderabile; Così continui al punto seguente subito dopo del lavaggio.
3.Mix uniformemente, altrimenti là sarà la riproducibilità indesiderabile.
la soluzione di arresto 4.The è la soluzione acida solforica da 2 m., evita contattare con la pelle.
5. Non usi il corredo che supera la sua data di scadenza. L'uso dei reagenti diluiti o adulterati dai corredi condurrà ai cambiamenti nella sensibilità e nei valori di rilevazione del OD. Non scambi i reagenti dai corredi dei numeri di lotto differenti per usare.
6. metta il microplate inutilizzato in una borsa di automatico-sigillamento per risigillarlo. La sostanza tipo ed il colore incolore precedenti è sensibili alla luce e non possono direttamente essere esposte così alla luce.
7. scarti la soluzione di colorazione con tutto il colore che indica la degenerazione di questa soluzione. Il valore di rilevazione delle 0 soluzioni tipo (0 ppb) di meno di 0,5 indica la sua degenerazione.
8. La temperatura ottimale della reazione è ℃ 25 e troppo alto o ugualmente le basse temperature provocheranno i cambiamenti nella sensibilità di rilevazione e nei valori del OD.

 

9. Data di scadenza e di stoccaggio

Stoccaggio: deposito a ℃ 2-8, non congelato.
Data di scadenza: 12 mesi; la data di produzione è sulla scatola.
Nota: Se l'imballaggio sotto vuoto dei piatti di microtitolo ha perdita, il piatto di microtitolo è normale ed efficace, non colpisca il risultato sperimentale. Senta libero prego per usare.

 

 

 

 

 

Q1: Quando sarà spedito?
A1: Spediremo appena possibile le merci per voi entro 7 giorni lavorativi dopo la ricezione del pagamento. (Nel caso dei fattori esterni quale l'epidemia, la consegna può essere ritardata)

 

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