La prova rapida Kit ELISA Test Kit 96 di influenza di maiali degli st di trichinella spiralis scaturisce/corredo GMP

L'anticorpo ELISA Test Kit 96 di trichinella spiralis dei maiali (T.s) scaturisce/corredo GMP

 

1. Principio

Questo dosagggio immunologico enzima-collegato indiretto di uso del corredo (ELISA) per individuare l'anticorpo di trichinella spiralis (T.s) nel siero o nel plasma dei maiali qualitativamente, assiste la rilevazione del trichinella spiralis dei maiali.
Se c'è anticorpo di trichinella spiralis (T.s) nel campione, si combinerà con l'antigene rivestito di trichinella spiralis (T.s) sul coniugato degli enzimi e della piastrina sul secondo punto. La reazione al colore rifletterà se c'è anticorpo di trichinella spiralis (T.s) nel campione.

 

2. Reagenti e contenuti

 

Codice	Oggetto	Spec.	Codice	Oggetto	Spec.
1	T.s-Ag ha ricoperto il piatto	96 pozzi	7	Fermi la soluzione	15 ml
2	Coniugato degli enzimi	12 ml	8	Controllo positivo	1 ml
3	soluzione di lavaggio 10X	100 ml	9	Controllo negativo	1 ml
4	Substrato A	15 ml	10	Stagnola adesiva	6 pezzi
5	Substrato B	15 ml	11	Strato di istruzione	1 pezzo
6	Diluente del campione	100 ml	12	Piatto del diluente del siero	2 pezzi

 

3. Materialrequired notprovided

1) Lettore di Microplate con 450nm e 630nm
2) un dispositivo termostatico di 37 ℃
3) micropipette, regolabili.

 

4. Requisito del campione

1) Questo corredo ha usato soltanto al siero o al plasma difficile dei maiali.
2) per ottenere il migliore risultato dei test, eviti usando il campione con emolisi severa, precipitato, contaminato dai batteri o dalla sospensione della proteina.
3) il campione del siero può immagazzinarlo al ℃for 2-8 a breve termine (in 3 giorni), se per il lungo termine, dovrebbe essere tenuto a -20℃or abbassare, evitare il congelamento ripetuto e lo scioglimento.

 

5. Metodo di prova

1) Lavare la preparazione della soluzione: Soluzione diluita di lavaggio 10X con acqua distillata o acqua deionizzata al 1:10 (per esempio: prenda la soluzione di lavaggio di 100ml 10X, aggiunga l'acqua distillata 900ml o l'acqua, la miscela deionizzate), la mescolano uniformemente per ottenere lavare la soluzione.
2) campione diluito: Campione diluito del siero con il diluente del campione al 1:100 (per esempio: il diluente del siero 5ul + del campione 495ul), lo mescola uniformemente, aggiunge il campione diluito del siero per provare i pozzi, 100ul/well.
Se il piatto del diluente del siero di uso per diluire il campione, il metodo così sta seguendo:
Diluisca al 1:100: in primo luogo, aggiunga il diluente del campione nei pozzi del campione su T.s-Ag ha ricoperto i piatti, 50ul/well. Aggiunga il diluente del campione 245ul nel piatto del diluente del siero, quindi aggiunga il siero 5ul, le pipette di uso soffiano uniformemente e si battono, quindi prendono 50ul in T.s-Ag hanno ricoperto i piatti per reagiscono.
(Nota: Il piatto del diluente del siero è eliminabile, non ripete l'uso)
3) aggiungere i comandi: Il controllo positivo ed il controllo negativo non devono diluirsi, aggiungerlo direttamente; Messo 2 pozzi per controllo negativo, aggiunga soltanto il controllo negativo 100ul; 2 pozzi per controllo positivo, aggiungono soltanto il controllo positivo 100ul. Il coperchio con stagnola adesiva, incuba nello scuro a 37℃for 30 minuti.
4) lavare piatto: scarti il liquido del pozzo, riempia pieno di soluzione di lavaggio ad ogni pozzo, lavante per 3 volte, sia statico per 1 min per ogni volta; finalmente tempo, falda di asciugarsi con la carta assorbente.
5) aggiungere il coniugato degli enzimi: aggiunga il coniugato ad ogni pozzo, 50ul/well, coperchio degli enzimi con stagnola adesiva, incubi nello scuro a 37℃for 30 minuti. Scarti il liquido dei pozzi e lavi 3 volte come descritto in punto 4).
6) aggiungere i substrati: Misuri come richiesto, prenda il volume uguale di miscela del substrato A e del substrato B uniformemente, quindi aggiunga la miscela 100ul/well. Il coperchio con stagnola adesiva, incuba a buio di 37℃in per 10 min.
7) ferma la reazione: Aggiunga 50ul fermano la soluzione in tutti i pozzi per fermare la reazione. Legga il valore del OD al lettore 450nm (630nm di ELISA come riferimento).

 

6. Riferimento

1) Valore di taglio (COV) = valore medio del OD di Control-X negativo 2,1 (calcoli come 0,08 quando il valore del OD del giudice negativo < 0=""> di convalida di controllo 2)
Controllo negativo OD value≤0.20 (se più di 0,20, la prova è invalido)
≥ positivo 0,50 di valore del OD di controllo (se meno di 0,50, la prova è invalido)

 

7. Interpretazione di risultati

≥ COV di valore del OD del campione: Positivo dell'anticorpo di trichinella spiralis (T.s);
Limitazione di valore del OD < COV:="" Trichinella="" spiralis=""> del campione: Questo corredo è per uso della ricerca soltanto, non per la diagnosi clinica.

 

8. Note

1) Ritorno alla temperatura ambiente prima dell'uso. Sigilli la striscia ed il deposito micro--bene inutilizzati a 2~8℃.
2) reagente della miscela anche prima dell'aggiunta del campione.
3) prima di incubazione, sigilli il piatto con il film adesivo, non si ripetono usano il film adesivo.
4) stringe tutta la post-utilizzazione dei cappucci, non mescola i cappucci. Non confonda mai i reagenti ed il manuale dai corredi della prova in numero di lotto differente.
5) i corredi ed il campione sprecati dovrebbero essere trattati come l'agente di infezione. Fermi la soluzione della reazione è corrosivo, sta attento ad usare.

 

9. Stoccaggio ed espirare data

Deposito a 2~8℃ nello scuro, nessun congelato, data di scadenza: 12 mesi.

 

 

Agente patogeno di trichinosi dei maiali

Gli adulti del trichinella spiralis parassitano l'intestino tenue dell'ospite e le larve parassitano i muscoli dello stesso ospite. Quando la gente o gli animali mangia la carne che contenente le larve del trichinella spiralis, le cisti si digeriscono e le larve sfuggono a nella mucosa del duodeno e del digiuno e si sviluppano negli adulti dopo i 1.5~3.0 giorni. L'adulto è un piccolo nematode bianco con la parte anteriore sottile e la parte posteriore spessa, che possono essere vedute a mala pena ad occhio nudo. Il maschio è di 1.4~1.6 millimetri di lunghezza e la femmina è di 3~4 millimetri di lunghezza. Dopo l'accoppiamento, i maschi muoiono e le femmine perforano nelle ghiandole intestinali o negli spazi linfatici submucosal per produrre le larve. La maggior parte delle larve raggiungono il dotto toracico con i linfonodi mesenterici e la vena cava anteriore sfocia nel cuore e poi si sparge al corpo intero con flusso sanguigno.

 

 

 

 

 

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