Nitrofurano SEM ELISA Food Safety Test Kit per la sensibilità 0.02ppb 96Wells/Kit del latte

Nitrofurano SEM ELISA Food Safety Test Kit per la sensibilità 0.02ppb 96Wells/Kit del latte

 

1. Principio di SEM ELISA Food Safety Test Kit del nitrofurano

 

Questo corredo della prova è basato sull'immunotest enzimatico competitivo per la rilevazione di nitrofurano (SEM) nel campione. Gli antigeni di coppia sono ricoperti prima sulle bande micro--bene. Il nitrofurano (SEM) nel campione e gli antigeni di coppia ricoperti prima sulle bande micro--bene competono per gli anticorpi di anti-SEM. Dopo che l'aggiunta del coniugato degli enzimi, il substrato di TMB si aggiunge per colorazione. Il valore di densità ottica (OD) del campione ha una correlazione negativa con SEM in. Questo valore è confrontato alla curva standard e la concentrazione di SEM successivamente è ottenuta.

 

2. Caratteristiche tecniche

 

Sensibilità: 0.02ppb

Temperatura di incubazione: 25℃

Tempo di incubazione: 30min~15min

Tessuto di limite di segnalazione, uovo, miele: 0.1ppb

Tasso di reazione crociata

SEM 100%

AMOZ < 0="">

AOZ < 0="">

AHD < 0="">

Tasso di recupero

Tessuto 75±25%

Miele 70±20%

Uovo 95±25%

 

3. Componenti di SEM ELISA Food Safety Test Kit del nitrofurano

 

1	Strisce micro--bene	12 strisce con 8 smontabili pozzi ciascuno
2	6× soluzione tipo (1 ml ciascuno)	0ppb	0.02ppb
		0.06ppb	0.18ppb
		0.54ppb	1.62ppb
3	Coniugato degli enzimi	7ml	spiritello malevolo
4	Soluzione di lavoro dell'anticorpo	7ml	cappuccio blu
5	Substrato A	7ml	cappuccio bianco
6	SubstrateB	7ml	berretto nero
7	Fermi la soluzione	7ml	cappuccio giallo
8	20× ha concentrato lavare l'amplificatore	40ml	cappuccio bianco
9	2× ha concentrato la ridissoluzione della soluzione	50ml	cappuccio trasparente
10	2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3)	10ml	berretto nero

 

4. Materiali richiesti ma non forniti

 

1) attrezzature: il lettore del microplate, lo stampatore, l'omogeneizzatore, il dispositivo dell'azoto-essiccazione, il vortice, centrifuga, misurante pipetta, equilibrio (una sensibilità reciproca di 0,01 g), incubatrice, bagno d'acqua;

2) Micropipettors: 20-200µL ad un solo canale, 100-1000µL e 30~300µl multicanale;

3) Reagenti: NaOH, acetato di etile, n-esano, HCI (36,5% approssimativi), K2HPO4·3H2O.

 

5. Pretrattamento del campione

 

Istruzioni

I seguenti punti devono occuparsi prima del pretrattamento affatto del genere di campione:

1) Soltanto le punte eliminabili possono essere usate per gli esperimenti e le punte devono essere cambiate una volta usate per l'assorbimento dei reagenti differenti;

2) Prima dell'esperimento, ogni attrezzatura sperimentale deve essere pulita e dovrebbe ri-essere pulita se necessario, per evitare la contaminazione che interferisce con i risultati sperimentali.

Preparazione della soluzione prima di pretrattamento del campione:

1) 0,1 M. K2HPO4: dissolva il g 11,4 K2HPO4·3H2O in acqua deionizzata a 500mL.

2) 1 m. HCl: dissolva 8.6mL HCI (36,5% approssimativi) in acqua deionizzata a 100mL.

3) Un NaOH da 1 m.: dissolva il NaOH 4g in acqua deionizzata a 100mL.

4) il 2×concentrated che ridissolve la soluzione è diluito con acqua deionizzata al 1:1 (1mL ha concentrato la ridissoluzione la soluzione + dell'acqua deionizzata 1mL), usato per la ridissoluzione del campione.

 

5,1 preparazione dei campioni

a) Tessuto, uovo

1) Pesi 1± 0.05g del campione omogeneizzato, aggiunga 4mL dell'acqua distillata, 0.5mL 1 la m. HCI e 100µL 2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3) ad ogni tubo, scuotono correttamente per 2min;.

2) Incubi il ℃ at37 durante la notte (ore approx16) o incubi at56℃ da bagno d'acqua (2 ore).

3) Aggiunga l'acetato di etile 5mL 0.1M K2HPO4, NaOH di 0.4mL 1M e 6mL ad ogni tubo, scossa per 30s.

4) Centrifuga a 4000r/min di cui sopra alla temperatura ambiente (℃ 20-25) per 10min (se c'è emulsionificazione o strato dell'acetato di etile non è abbastanza per 3ml, non incubano campione a bagno d'acqua 80℃ per 10min e la centrifuga ripetutamente; o aumenti la velocità ed estenda il periodo della centrifuga).

5) Trasferimento 3mL dello strato dell'acetato di etile in un nuovo tubo centrifugo ed evaporare allo stato secco da azoto o da aria a 50℃.

6) Dissolva i residui asciutti in n-esano 2mL, aggiunga 1mL della soluzione di ridissoluzione diluita, miscela correttamente per 30 secondi, centrifuga superiore a 4000 r/min alla temperatura ambiente (℃ 20-25) per il min 10; Rimuova la fase del n-esano di su-strato (se c'è emulsionificazione, dopo l'eliminazione della fase del n-esano di su-strato, incubano campione a bagno d'acqua 70℃ per 10-20min, centrifugano ripetutamente).

7) Prenda a 50 il µL del più basso per l'analisi.

Popolare di diluizione del campione: 2

b) Miele

1) Pesi 2± 0.05g del campione omogeneizzato (miele), aggiunga 4mL dell'acqua distillata, 0.5mL 1 la m. HCI e 100 il µL 2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3) ad ogni tubo, scuote correttamente per 2min;.

2) Incubi il ℃ at37 durante la notte (ore approx16) o incubi at56℃ da bagno d'acqua (2 ore).

3) Aggiunga l'acetato di etile 5mL 0.1M K2HPO4, NaOH di 0.4mL 1M e 6mL ad ogni tubo, scossa per 30s.

4) Centrifuga a 4000r/min di cui sopra alla temperatura ambiente (20-25℃) per 10min (se c'è emulsionificazione o strato dell'acetato di etile non è abbastanza per 3ml, non incubano campione a bagno d'acqua 80℃ per 10min e la centrifuga ripetutamente; o aumenti la velocità ed estenda il periodo della centrifuga).

5) Trasferimento 3mL dello strato dell'acetato di etile in un nuovo tubo centrifugo ed evaporare allo stato secco da azoto o da aria a ℃ 50.

6) Dissolva i residui asciutti in n-esano 2mL, aggiunga 1mL della soluzione di ridissoluzione diluita, miscela correttamente per 30 secondi, centrifuga sopra a 4000r/min alla temperatura ambiente (℃ 20-25) per il min 10; Rimuova la fase del n-esano di su-strato (se c'è emulsionificazione, dopo l'eliminazione della fase del n-esano di su-strato, incubano campione a bagno d'acqua 70℃ per 10-20min, centrifugano ripetutamente).

7) Prenda a 50 il µL del più basso per l'analisi.

Popolare di diluizione del campione: 1

 

6. Procedure di ELISA

 

6,1 istruzioni

1) Porti tutti i reagenti e strisce micro--bene alla temperatura ambiente (℃ 20-25) prima dell'uso;

2) Restituisca tutti i reagenti a ℃ 2-8 subito dopo di uso;

3) La riproducibilità dell'analisi di ELISA, in larga misura, dipende dalla consistenza del lavaggio del piatto. L'operazione corretta di lavare del piatto è il punto chiave in ELISA le procedure;

4) Per l'incubazione alle temperature costanti, tutti i campioni e reagenti devono evitare l'esposizione alla luce ed ogni microplate dovrebbe essere sigillato dalla membrana della copertura.

 

6,2 procedure di operazione

1) Metta il corredo alla temperatura ambiente (20-25°C) per almeno 30 minuti, noti che ogni reagente deve essere scosso e mescolato molto prima di uso e metta le strisce richieste del microwell nella struttura del piatto. I microplates inutilizzati dovrebbero essere risigillati e memorizzati a 2-8°C, non congelato.

2) Preparazione della soluzione: La presa 40 ml di 20× ha concentrato lavare l'amplificatore e diluirlo con acqua deionizzata al 1:19 (1 parte di 20× ha concentrato lavare l'amplificatore + 19 parti dell'acqua deionizzata). O prepari come stato necessario.

3) Numerazione: Numeri i microwells secondo i campioni e le soluzioni tipo; ogni campione e soluzione tipo dovrebbero essere fatti due volte e le loro posizioni dovrebbero essere registrate.

4) Aggiunga 50µL del campione o della soluzione tipo per duplicare i pozzi; aggiunga 50ul del coniugato degli enzimi ad ogni pozzo, poi aggiunga 50µL della soluzione di lavoro dell'anticorpo e scuota il piatto per mescolarsi delicatamente. Sigilli il microplate con un film della copertura ed incubi a 25°C per 30min.

5) Versi fuori il liquido nei microwells, picchiettio asciutto su carta assorbente, aggiunga 250 μL/well di lavare l'amplificatore per lavare il piatto del microwell per i 15-30s, poi elimini e picchietti asciutto con carta assorbente, ripeti 4-5 volte. (Se ci sono bolle di aria dopo la spillatura, le hanno tagliate fuori con una punta pulita).

6) Sviluppo di colore: Aggiunga µL 50 il µL del substrato A e 50 del substrato B ad ogni pozzo. Scuota a mano il piatto per mescolarsi delicatamente ed incubare a 25°C per il min 15 nello scuro per lo sviluppo di colore.

7) Analisi: Aggiunga il μL 50 della soluzione di arresto ad ogni pozzo. Mescoli delicatamente scuotendo il piatto a mano. Fissi la lunghezza d'onda del lettore del microplate a 450 nanometro per determinare il valore del OD di ogni pozzo. (È raccomandato per leggere il valore del OD alla lunghezza d'onda doppia 450/630nm in 5 minuti).

 

7. Giudizio di risultato

 

Ci sono due metodi per giudicare i risultati: quello primo è il giudizio approssimativo, mentre il secondo è la determinazione quantitativa. Nota che il valore del OD del campione ha una correlazione negativa con il contenuto di SEM.

7,1 determinazione qualitativa

La gamma di concentrazione (ng/ml) può essere ottenuta dal paragonare il valore medio del OD del campione a quello della soluzione tipo. Presupporre che il valore del OD del campioneⅠ sia 0,3 e quello del Ⅱ del campione è 1.0ppb, il valore del OD delle soluzioni tipo è: 2,243 per 0ppb, 1,816 per 0.02ppb, 1,415 per 0.06ppb, 0,74 per 0.18ppb, 0,313 per 0.54ppb, 0,155 per 1.62ppb, la gamma di concentrazione del Ⅰ del campione sono di conseguenza 0,54 a 1.62ppb e quello del Ⅱ del campione è 0,06 a 0.18ppb.

7,2 determinazione quantitativa

I valori medi dei valori di capacità di assorbimento è ottenuto per il valore medio del OD (B) del campione e della soluzione tipo divisi dal valore del OD (B0) della prima soluzione tipo (0 standard) e successivamente moltiplicati per 100%, cioè,

Percentuale di valore di capacità di assorbimento =	B	×100%
	B0

Valore del OD di media di B-the (doppi pozzi) del campione o della soluzione tipo

Valore del OD di media di B0-the della soluzione tipo 0ng/mL

Disegni la curva standard con le percentuali di assorbimento della soluzione tipo ed i valori del semilogarithm della soluzione tipo di SEM (ng/ml) come y e ascissa, rispettivamente. Legga la concentrazione corrispondente del campione dalla curva standard comprendendo la sua percentuale di assorbimento nella curva standard. Il valore risultante successivamente è moltiplicato per il popolare corrispondente di diluizione, infine ottenente la concentrazione di SEM nel campione.

 

8. Precauzioni

 

1) Se la temperatura ambiente è più bassa di 25℃ o la temperatura del reagente ed il campione non ritornano alla temperatura ambiente (20-25℃), il valore standard del OD cadrà.

2) Durante il processo di lavaggio, l'essiccazione del microplate sarà accompagnata dalla non linearità della curva standard e la riproducibilità non è ideale; quindi, procedi al punto seguente subito dopo del lavaggio.

3) Mescoli bene, altrimenti la riproducibilità sarà povera.

4) La soluzione di arresto è una soluzione acida solforica da 2 m., evita il contatto di pelle.

5) Non usi il corredo oltre la durata di prodotto in magazzino. L'uso dei reagenti diluiti o adulterati dal corredo può provocare i cambiamenti nei valori del OD di rilevazione e della sensibilità. Non sostituisca i reagenti nelle serie differenti di corredi.

6) Risigilli i microplates inutilizzati in borse a chiusura lampo. Le soluzioni tipo e gli accoppiatori incolori sono sensibili alla luce e non possono direttamente essere esposti per accendersi.

7) Scarti tutta la soluzione di coloritura di cui il colore indica che la soluzione si è degradata. Un valore di rilevazione di meno di 0,5 per soluzione tipo 1 (0 ppb) indica la degradazione.

8) La temperatura ottimale della reazione è 25℃ e la sensibilità di rilevazione ed il valore del OD cambieranno se la temperatura è troppo alta o troppo bassa.

 

9. Data di scadenza e di stoccaggio

 

Stoccaggio: Il deposito a 2-8°C, non si congela.
Data di scadenza: 12 mesi; la data di produzione è sulla scatola.
Nota: Se le perdite d'imballaggio sotto vuoto del microplate, possono ancora essere usate senza colpire i risultati dei test, in modo da voi può usarlo con fiducia.

 

Q1: Quando sarà spedito?
A1: Spediremo appena possibile le merci per voi entro 7 giorni lavorativi dopo la ricezione del pagamento. (Nel caso dei fattori esterni quale l'epidemia, la consegna può essere ritardata)

 

Q2: Sostiene OEM/ODM?
A2: Può essere sostenuto, ma la quantità specifica deve essere più di 100.000 pezzi, che è conveniente per i prodotti su misura.

 

Q3: Come la vostra fabbrica sta facendo in termini di controllo di qualità?
A3: Nazionalmente abbiamo certificato ISO9001 e ISO13485. Il nostro processo di produzione si conforma alle procedure standard per assicurare la qualità del prodotto ottimale.

 

Q4: Come fornire al servizio di assistenza al cliente?
A4: Forniamo al servizio di assistenza al cliente tecnico online professionale. Possiamo fornirgli orientamento tra due persone via il video, il telefono, ecc.

 

Q5: Che cosa è il metodo di pagamento?
A5: Riceviamo il pagamento da T/T.

 

Q6: Come spedire?
A6: Scelga il migliore metodo di spedizione per voi ottenendo le citazioni dai nostri molti trasportatori cooperativi ed anche dalla nave secondo i vostri requisiti.