Corredi diagnostici veterinari PPRV ab ELISA Kit For Ovine dei ruminanti di Petits

Corredi diagnostici veterinari PPRV ab ELISA Kit For Ovine dei ruminanti di Petits

 

Virus dei ruminanti del DES Petits di Peste (PPRV) ab ELISA Kit per i 96 pozzi ovini/corredo

 

1. Uso

È usato per individuare qualitativamente l'anticorpo di PPRV in siero ed in plasma delle pecore e della capra, per valutare lo stato immune del vaccino dei ruminanti dei petits del DES di Peste e la diagnosi sierologica assistita degli animali infettati.

2. Principio

Questo metodo ELISA della concorrenza di uso del corredo, antigene di PPRV è ricoperto prima sulle strisce micro--bene degli enzimi. Nel provare, aggiunga il campione diluito del siero e coniugato monoclonale degli enzimi, dopo incubazione, se c'è anticorpo specifico del virus della PPR, legherà all'antigene di PPRV sul piatto ricoprente ed impedirà l'anticorpo monoclonale enzima-identificato legare all'antigene sul piatto; per contro, se il campione non contiene l'anticorpo PPRV-specifico, non legherà al piatto ricoprente. Dopo avere lavato per rimuovere l'anticorpo non legato ed altre componenti, aggiunga il substrato ai microwells per formare un prodotto blu con la catalisi enzimatica. Dopo l'aggiunta della soluzione di arresto per terminare la reazione, usi un lettore del microplate alla lunghezza d'onda del doppio 450nm/630nm per misurare bene la capacità di assorbimento un valore nella reazione.

3. Le componenti del corredo

 

1	L'antigene di PPRV ha ricoperto il microplate	96T X 2
2	Coniugato degli enzimi	12ml	coperchio giallo
3	Diluizione del campione	25ml	coperchio trasparente
4	Siero negativo di controllo di PPRV-IgG	1ml	coperchio verde
5	Siero positivo di controllo di PPRV-IgG	1ml	coperchio rosso
6	Substrato	12ml X2	coperchio arancio
7	Fermi la soluzione	12ml	coperchio blu
8	amplificatore di lavaggio 10×concentrated	50ml	coperchio bianco
9	Stagnola adesiva	2 pezzi
10	Istruzione	1 pezzo

 

4. Il materiale richiesto non ha fornito

1) Micropipetta: 0.5-10ul, 10ul-100ul, 100ul-1000ul.
2) punte eliminabili della pipetta.
3) laureato: 500ml.
4) lettore di Microplate: 96 pozzi con la lunghezza d'onda 450/630nm.
5) acqua distillata o acqua deionizzata.
6) rondella di Microplate

5. Preparazione del campione

Prenda l'intero sangue animale, ottengono il siero usando il metodo regolare, il siero se luminoso e nessun'emolisi.

6. Lavare la preparazione dell'amplificatore

L'amplificatore di ritorno di lavaggio concentrato 10X nella temperatura ambiente prima dell'uso, se ci sono cristalli del sale, lo ha messi dentro ad un bagno d'acqua di 37 ℃ affinchè 5~10min lo dissolva, poi per diluirlo con acqua deionizzata a 10 volte (per esempio, preparare l'amplificatore di lavaggio 200ml: 180ml dell'acqua deionizzata + di 20ml di 10X ha concentrato l'amplificatore di lavaggio, lo mescola uniformemente). L'amplificatore lavante diluito può essere immagazzinato a 4℃for circa una settimana.
 

7. Note

1) Restituisca tutti i reagenti nella temperatura ambiente prima dell'uso, metta tutti i reagenti alla temperatura ambiente per almeno 30 minuti. Scuota uniformemente prima dell'uso ed il deposito di nuovo ad uso 2-8℃after.
2) non mescola i reagenti di uso dai corredi differenti e no. differente del lotto, impedisce i reagenti inquinante quando usando.
3) la soluzione di arresto e del substrato può avere irritazione a pelle e gli occhi, stanno attenti ad usare.
4) non espone il substrato a forte luce e non evita il contatto con l'ossidante.
5) l'PPRV-AG ha ricoperto i piatti dovrebbe essere sigillato ed a prova d'umidità. Metta il piatto inutilizzato posteriore di MicroWell nella borsa asciutta della stagnola ed ha sigillato a ℃ 2-8.
6) tutti gli sprechi dovrebbero essere trattati bene per evitare l'inquinamento prima dello scarto.
7) la conformità rigorosa with le istruzioni operative può ottenere i migliori risultati. Pipettando l'operazione, la sincronizzazione e lavare di intero processo devono essere precise.

8. Metodo di prova

1) Prenda il microplate ricoperto prima (secondo il numero dei campioni, può essere smontato esclusivamente ed usato), messo 2 pozzi per controllo positivo, 2 pozzi per controllo negativo, aggiunga il siero positivo di controllo 50µl o il siero negativo di controllo a è bene di conseguenza; altri sono bene campione, in primo luogo aggiungere la diluizione del campione 40µl, quindi aggiungono il campione 10µl in ogni pozzo. Finalmente, aggiunga il coniugato degli enzimi 50µl ad ogni pozzo, scuotono delicatamente per mescolarlo uniformemente, coprono il piatto di stagnola adesiva, incubano a 37 resoconti del ℃ for30;
2) apre la stagnola adesiva, scarta il liquido del pozzo, aggiunge l'amplificatore diluito ad ogni pozzo, 300ul/well di lavaggio, è statico per 30s, poi scarta il liquido, ripete il punto di cui sopra per 5 volte, finalmente falda asciugarsi con la carta assorbente;
3) aggiunge la soluzione del substrato, 100ul/well, la mescola uniformemente poi per riguardarla di stagnola adesiva, incuba a 37 resoconti del ℃in darkfor15;
4) aggiunge ferma la soluzione 50ul/well per fermare la reazione, misura il risultato in 10 minuti.

9. Giudizio di risultati

Legga il valore del OD con ELISA Reader a 450nm (630nm come riferimento).
Affinchè l'analisi siano valida:
Valore del OD di controllo negativo (N)≥1.0,
Valore del OD di controllo positivo (p) ≤0.3;
Calcoli il metodo:
Valore medio di valore del OD del campione/del OD di valore negativo di controllo (N)= S/N
Interpretazione di risultati
S/N value≥0.5: Negazione
Valore di S/N<0>

10. Stoccaggio ed espirare data

Deposito a 2~8℃ nello scuro, nessun congelato, data di scadenza: 12 mesi.

 

 

Sintomi clinici

1. La maggior parte del tipo acuto

È comune in capre. Dopo un periodo di incubazione medio di 2 giorni, la temperatura corporea aumenta improvvisamente a 40-41 gradi, o persino 42 gradi, con la depressione, capelli rizzanti e perdita o scomparsa di appetito. Allo stesso tempo, c'è strappi e muco nasale sieroso. Infiammazione catarrale della bocca, a volte ulcerazione della mucosa, o morte prima che accada. Tuttavia, l'iperemia del dente m. è comune. Prima costipazione, quindi diarrea massiccia, ma nessun panchetto sanguinoso. Sofferto da guasto delle pecore, dal calo di temperatura e dalla morte improvvisa. Il corso della malattia è dei 5 - 6 giorni ed il tasso di incidenza è alto quanto 100%. Nel caso degli scoppi seri, il tasso di mortalità è 100%; In casi delicati, il tasso di mortalità non supera 50%. La prestazione di giovani pecore è severa, con l'alti tasso di incidenza e mortalità.

2. Tipo acuto

Il periodo di incubazione è dei 3 - 4 giorni ed i sintomi sono gli stessi dei sintomi più acuti, ma il corso della malattia è più lungo, in modo dal succo nasale sieroso e viscoso si gira verso mucopurulent e le narici presto saranno bloccate. Le mucose della lingua, della guancia, della mandibola superiore e della faringe compaiono ulcera. Sta necrotizzandosi spesso la stomatite. Nei casi delicati, i piccoli fuochi necrotici superficiali rossi compaiono e nei casi severi, l'intera cavità orale è colpita. Le pecore malate sono assetate e non mangiano. La diarrea persistente del getto accade. Se avete la respirazione e tosse della difficoltà, indica l'infezione respiratoria. la Vaginale-vaginite si presenta spesso in pecore, accompagnate dalla secrezione mucopurulent. Le pecore incinte possono causare l'aborto. Il corso della malattia è dei 8-10 giorni. Alcuni sono morto della malattia concorrente, alcuna recuperata ed alcuni sono diventato cronici.

3. Tipo sub-acuto o cronico

È comune dopo la fase acuta. I sintomi iniziali sono gli stessi come sopra. I noduli e le cicatrici purulente intorno alla bocca e le narici come pure il collare più basso sono i sintomi speciali della fase recente di questo tipo, che sono confusi facilmente con le cicatrici purulente contagiose. Il corso della malattia è dei 10-15 giorni. Le pecore mostrano generalmente il processo sub-acuto e poi recuperano, o non mostrano i sintomi.

 

 

 

 

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