La rabbia ELISA Test Kit canina 96 del virus scaturisce/anticorpo del corredo ISO9001

L'anticorpo ELISA Kit del virus della rabbia per l'animale domestico 96 scaturisce/corredo il GMP ISO9001

1. Introduzione

Il corredo di ELISA dell'anticorpo del virus della rabbia (RBV) è usato per provare l'anticorpo del virus della rabbia in siero dei cani, dei gatti ecc., usati per valutare lo stato della vaccinazione della rabbia.
Questo metodo ELISA del blocchetto di uso del corredo, antigene della rabbia è ricoperto prima sulle strisce micro--bene degli enzimi. Nel provare, aggiunga il campione diluito del siero, dopo incubazione, se c'è anticorpo specifico del virus della rabbia, si combinerà con l'antigene ricoperto prima, scartare l'anticorpo non legato ed altre componenti con il lavaggio; poi aggiunga l'anticorpo monoclonale identificato enzima del virus antirabbico, anticorpo in campione per bloccare la combinazione di anticorpo monoclonale e di antigene ricoperto prima; scarti il coniugato non legato degli enzimi con il lavaggio; Aggiunga il substrato di TMB in micro-pozzi, il segnale blu dalla catalisi degli enzimi è nella proporzione inversa di contenuto dell'anticorpo in campione, lettore di ELISA di uso a wavelenth 450nm misurare la capacità di assorbimento un valore in pozzi della reazione dopo l'aggiunta della soluzione di arresto per fermare la reazione.

2. Reagenti e contenuti

3. Materialrequired notprovided

1) Micropipetta: 10ul-100ul, 100ul-1000ul.
2) punte eliminabili della pipetta.
3) laureato: 500ml.
4) lettore di Microplate: 96 pozzi.
5) acqua distillata o acqua deionizzata.
6) rondella di Microplate

4. Preparazione del campione

Prenda l'intero sangue animale, ottengono il siero usando il metodo regolare, il siero se luminoso e nessun'emolisi

5. Lavare la preparazione dell'amplificatore

Il ritorno 10X ha concentrato lavare l'amplificatore nella temperatura ambiente prima dell'uso, se ci sono cristalli del sale, scuote per farlo dissolto, poi diluito a 10 volte con acqua distillata o l'acqua deionizzata. L'amplificatore lavante diluito può immagazzinare a 4℃for circa 1 settimana.

6. Note

1) Restituisca tutti i reagenti nella temperatura ambiente prima dell'uso, scuota uniformemente prima dell'uso ed il deposito di nuovo ad uso 2-8℃after.
2) non mescola i reagenti di uso dai corredi differenti e no. differente del lotto, impedisce i reagenti inquinante quando usando.
3) il substrato A e la soluzione di arresto possono avere irritazione a pelle e gli occhi, stanno attenti ad usare.
4) non espone il substrato a forte luce e non evita il contatto con l'ossidante.
5) l'RBV-AG ha ricoperto i piatti dovrebbe essere sigillato ed a prova d'umidità. Metta il piatto inutilizzato posteriore di MicroWell nella borsa asciutta della stagnola ed ha sigillato a ℃ 2~8.
6) tutti gli sprechi dovrebbero essere trattati bene per evitare il pullution prima dello scarto.
7) la conformità rigorosa with le istruzioni operative può ottenere i migliori risultati. Pipettando l'operazione, la sincronizzazione e lavare di intero processo devono essere precise.
8) l'RBV-AG ha ricoperto i piatti è eliminabile, non ripete l'uso.

7. Metodo di prova

1) Per ogni prova, insieme 1 bene per controllo positivo e 2 pozzi per controllo negativo, controllo negativo e controllo positivo non debba diluirsi, direttamente aggiungere ai suoi pozzi corrispondenti, 100ul/well;
2) aggiunge il diluente nei pozzi della reazione, 80ul/well del campione, quindi aggiunge il siero, 20ul/well, colpo e lo batte ad anche. (Non mescoli l'uso le punte);
3) lo copre di stagnola adesiva, ℃ del incubateat 37 per 30 minuti;
4) apre la stagnola adesiva, scarta il liquido del pozzo, aggiunge l'amplificatore diluito ad ogni pozzo, 250ul/well di lavaggio, scarta il liquido, ripete il punto di cui sopra per 5 volte, finalmente falda asciugarsi con la carta assorbente;
5) aggiungendo il coniugato degli enzimi, 100ul/well, lo coprono di stagnola adesiva, resoconto del ℃ for30 del incubateat 37;
6) aperto la stagnola adesiva, scarta il liquido del pozzo, lavante per 5 volte come punto 4), ricorda finalmente la falda per asciugarsi con la carta assorbente;
7) aggiunge il substrato, 100ul/well, lo mescola uniformemente poi per coprirlo di stagnola adesiva, resoconto del ℃in darkfor15 del incubateat 37;
8) aggiunge la soluzione di arresto, 50ul/well per fermare la reazione, misura il risultato in 10 minuti.

8. Giudizio di risultati

Legga il valore del OD a 450nm (630nm come riferimento).
Affinchè l'analisi siano valida:
Valore del OD di controllo negativo (N) > 0,5, nel frattempo tasso di didascalia positivo di valore (p) > 60%
Calcoli il metodo:
Pi (tasso di blocco) = 1 - (campione il OD stima il valore medio del OD di controllo negativo)
Resultsinterpretation
Pi (tasso di didascalia) > 60%: Positivo
Pi (tasso di didascalia) ≤60%: Negazione
(Nota: quando PI=60%, significa l'UI/ml di titolo 0,5 dell'anticorpo)

9. Stoccaggio ed espirare data

Deposito a 2~8℃ nello scuro, nessun congelato, data di scadenza: 12 mesi.

Pathogeny

- Pricipalmente è causato dalla trasmissione del virus della rabbia agli esseri umani attraverso gli animali. Il virus della rabbia contiene cinque proteine, cioè glicoproteina (G), nucleoproteina (n), polimerasi (l), fosfoproteina (NS) e matrice (m). La glicoproteina del virus della rabbia può combinarsi con acetilcolina, che determina la nevroticità del virus della rabbia. La fonte di infezione principale è cani malati, seguiti dai gatti malati e dai lupi malati. Dopo che una persona è morsa da un animale malato, il virus nella saliva animale fornisce il corpo umano attraverso la ferita e causa la malattia. Alcuni pazienti possono anche ammalarsi perché la congiuntiva è contaminata dalla saliva dell'animale malato.

- La gente è generalmente suscettibile della rabbia, mentre gli allevatori dei cacciatori, del veterinario e sono più suscettibili. Dopo che il virus della rabbia entra nel corpo umano, in primo luogo infetta le cellule di muscolo, prolifera in una piccola quantità nelle cellule di muscolo vicino alla ferita e poi invade i nervi periferici vicini. Poi, il virus si sparge al nervo centrale lungo l'asse del nervo periferico e non non estendere al sangue. Pricipalmente invade i neuroni nel tronco encefalico e nel cervelletto. Il virus ripiega in un gran numero nella materia grigia e raggiunge la ghiandola salivare, la cornea, la mucosa nasale, il polmone, la pelle ed altre parti lungo il nervo. Il danneggiamento principale del virus della rabbia dell'ospite viene dal reticolo endoplasmatico, che è le particelle eosinofile costituite dall'accumulazione delle sue coperture scartate della proteina nella cellula. Il reticolo endoplasmatico ampiamente si distribuisce nelle cellule nervose centrali dei pazienti ed è inoltre un indicatore della diagnosi del laboratorio della malattia.

- Dopo l'infezione, non tutta la gente si ammalerà. Circa 15% - 20% della gente che è morsa dai cani malati senza iniezione preventiva si ammalerà e circa 50% - 60% della gente che è morsa dai lupi malati si ammaleranno. I fattori di incidenza sono collegati con il sito del morso, il grado arrotolato, il trattamento arrotolato, lo spessore di abbigliamento e la vaccinazione.

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