la micotossina di 0.1ppb Zearalenone che prova i corredi a cereale 96 dell'alimentazione scaturisce/corredo

Zearalenone ELISA Test Kit per il cereale 96 Wells/Kit Sensitivity dell'alimentazione 0,1 ppb

 

1. Principio

Questo corredo della prova è basato sull'immunotest enzimatico competitivo per la rilevazione di Zearalenone. L'antigene di coppia è ricoperto prima sulle bande micro--bene. Lo Zearalenone nel campione e gli antigeni di coppia ricoperti prima sulle bande micro--bene competono per gli anticorpi anti- di Zearalenone. Dopo che l'aggiunta del coniugato degli enzimi, il substrato di TMB si aggiunge per colorazione. Il valore di densità ottica (OD) del campione ha una correlazione negativa con lo Zearalenone nel campione. Questo valore è confrontato alla curva standard ed i residui di Zearalenone successivamente è ottenuto.

2. Caratteristiche tecniche

Sensibilità: 0,1 ppb
Temperatura dell'incubatrice: 25℃
Tempo dell'incubatrice: 30min~15min

Limite di segnalazione:
Alimentazione 10ppb
Riso, cereale, arachide 5ppb

Tasso di reazione crociata:
Zearalenone 100%

Tasso di recupero:
Alimentazione, riso, arachide, cereale 100±30%

3. Componenti

 

 

1	Strisce micro--bene	12 strisce con 8 pozzi smontabili ciascuno
2	6× soluzione tipo (1 ml ciascuno)	0 ppb	0,1 ppb
		0,3 ppb	0,9 ppb
		ppb 2,7	ppb 8,1
3	Coniugato degli enzimi	7 ml	spiritello malevolo
4	Soluzione di lavoro dell'anticorpo	7 ml	cappuccio blu
5	Substrato A	7 ml	cappuccio bianco
6	SubstrateB	7 ml	berretto nero
7	Fermi la soluzione	7 ml	cappuccio giallo
8	20X ha concentrato lavare l'amplificatore	40 ml	cappuccio bianco
9	2X ha concentrato la ridissoluzione della soluzione	50 ml	cappuccio trasparente

 

4. Materiali richiesti ma non forniti

1) Attrezzatura: ELISA Reader (450 nm/630nm), omogeneizzatore, agitatore, centrifuga, equilibrio: 0.01g quantità sensibile, dispositivo dell'azoto-essiccazione, incubatrice, pipette graduate, stampante
2) micropipette: 20l ad un solo canale ~ 200l, 100l ~ 1000l, μl multicanale 30~300
3) reagenti: Metanolo, n-esano.

5. Pretrattamento del campione

Istruzioni (i seguenti punti devono occuparsi prima del pretrattamento)
1) soltanto le punte eliminabili possono essere usate per gli esperimenti e le punte devono essere cambiate una volta usate per l'assorbimento dei reagenti differenti;
2) prima dell'esperimento, ogni utensile sperimentale deve essere pulito e dovrebbe ri-essere pulito se necessario, per evitare la contaminazione che interferisce con i risultati sperimentali.

Preparazione della soluzione prima di pretrattamento del campione:
No. 1 della soluzione: Provi la ridissoluzione
Il 2×concentrated che ridissolve la soluzione è diluito con acqua deionizzata al 1:1 (1part ha concentrato la ridissoluzione la soluzione + dell'acqua deionizzata 1part), usato per la ridissoluzione del campione.
No. 2 della soluzione: Soluzione dell'estratto- campione
7 parti di metanolo + 3 parti di acqua deionizzata per ottenere la soluzione pronta per l'uso dell'estratto- campione.

Preparazione dei campioni
5,1 preparazione del campione dell'alimentazione
1) prende 1.0±0.05g grinded il campione dell'alimentazione nel tubo centrifugo 50ml, aggiunge la soluzione dell'estratto- campione 5ml;
2) scossa completamente per 3min (o scuotere a mano per sopra 5min), centrifuga sopra a 4000r/min a 20℃ per il min 10;
3) il surnatante della presa 50ul (su-strato), aggiunge il campione 950ul che ridissolve, scuote ad uniformemente;
4) prende 50μl per provare
Fattore di diluizione: 100
Nota: se la concentrazione del residuo della droga nel campione è fuori portata della curva, il campione può più ulteriormente essere diluito per la prova (per esempio: prenda 50ul il surnatante (su-strato) in un nuovo tubo centrifugo, aggiunga 1450ul ha deionizzato l'acqua, il fattore di diluizione è 150).

5.2Preparation di cereale, campione del riso
1) prende 1.0±0.05g grinded il campione nel tubo centrifugo 50ml; aggiunga la soluzione dell'estratto- campione 5ml;
2) scossa completamente per 3min (o scuotere a mano per sopra 5min), centrifuga sopra a 4000r/min a 20℃ per il min 10;
3) il surnatante della presa 100ul (su-strato), aggiunge il campione 900ul che ridissolve, scuote ad uniformemente;
4) prende 50μl per provare
Fattore di diluizione: 50
Nota: Se la concentrazione nel residuo della droga del campione è fuori portata della curva, il campione può più ulteriormente essere diluito per la prova (per esempio: prenda 50ul il surnatante (su-strato) in un nuovo tubo centrifugo, aggiunga l'acqua deionizzata 950, il fattore di diluizione è 100).

5.3Preparation del campione dell'arachide
1) prende 1.0±0.05g grinded il campione dell'arachide nel tubo centrifugo 50ml; aggiunga la soluzione dell'estratto- campione 5ml, quindi aggiunga il n-esano 4ml;
2) scossa completamente per 3min (o scuotere a mano per sopra 5min), centrifuga sopra a 4000r/min a 20℃ per il min 10;
3) liquido di su-strato di scarto il chiaro, prende il liquido di medio-strato 100ul, aggiunge il campione 900ul che ridissolve, scuote ad uniformemente;
4) prende 50μl per provare
Fattore di diluizione: 50
Nota: Se la concentrazione nel residuo della droga del campione è fuori portata della curva, il campione può più ulteriormente essere diluito per la prova (per esempio: prenda il liquido di medio-strato 50ul in un nuovo tubo centrifugo, aggiunga l'acqua deionizzata 950, il fattore di diluizione è 100).

 

6. Procedure di ELISA

6,1 istruzioni
1. porti i reagenti di ELISA alla temperatura ambiente (20 - °C) 25 prima dell'uso.
2. reagenti messi di ELISA di nuovo a ℃ 2-8 subito dopo di uso
3. La riproducibilità di ELISA nel processo dell'analisi è in gran parte dipende dalla consistenza del piatto lavante, l'operazione lavante corretta del piatto è il punto del programma di ELISA della determinazione
4. In tutto il processo di incubazione della temperatura costante, eviti l'esposizione alla luce, guarnizione il microplate con la membrana della copertura.

6,2 procedure di operazione

1. Metta il corredo alla temperatura ambiente (20-25°C) per almeno 30 minuti, noti che ogni reagente deve essere scosso molto prima di uso;
2. posto le strisce desiderate del microwell nel telaio del piatto. I microplates inutilizzati dovrebbero essere risigillati e memorizzati a 2-8°C, non congelato.
3. preparazione della soluzione: Prenda 40ml di 20× ha concentrato lavare l'amplificatore e dissolverlo in acqua deionizzata ad un rapporto del 1:19 (1 parte dell'amplificatore di lavaggio concentrato 20× + 19 parti di acqua deionizzata), o preparano come necessario.
4. numerazione: Numeri i microwells secondo i campioni e le soluzioni tipo; ogni campione e soluzione tipo dovrebbero essere fatti due volte; registri le loro posizioni.
5. aggiunga la norma/campione: Aggiunga il µL 50 del campione o della soluzione tipo per separare i doppi pozzi, quindi aggiunga il coniugato degli enzimi, 50 µL/well; poi soluzione di lavoro dell'anticorpo, 50 µL/well. Mescoli delicatamente scuotendo il piatto a mano, la guarnizione il microplate con un film della copertura ed incubi a °C 25 per il min 30 nello scuro.
6. lavaggio il microplate: Apra con attenzione il film della copertura e versi fuori il liquido nel microwell; aggiunga 250 µL/well dell'amplificatore di lavaggio, lavi completamente 4-5 volte per 15-30 s ogni volta, poi rimuovala con carta assorbente Pat asciutto. (Punga le bolle di aria con una lancia inutilizzata dopo l'essiccamento)
7. sviluppo di colore: Aggiunga il µL 50 della soluzione del substrato A ad ogni pozzo, seguito delicatamente da µL 50 della soluzione B. Mix scuotendo il piatto a mano ed incubi per il min 15 a °C 25 nello scuro per macchiare.
8. analisi: Aggiunga il µL 50 della soluzione di arresto ad ogni pozzo. Mescoli delicatamente scuotendo il piatto a mano. Fissi la lunghezza d'onda del lettore del microplate a 450 nanometro per determinare il valore del OD di ogni pozzo. (È raccomandato per leggere i valori del OD alle lunghezze d'onda doppie 450/630 di nanometro in 5 minuti).

 

7. Giudizio di risultato

Ci sono due metodi per giudicare i risultati; quello primo è il giudizio approssimativo, mentre il secondo è la determinazione quantitativa. Nota che il valore del OD del campione ha una correlazione negativa con lo Zearalenone nel campione
7,1 determinazione qualitativa
La gamma di concentrazione (ppb) può essere ottenuta tramite rispetto il valore medio di capacità di assorbimento alle norme. Supponga che il valore di capacità di assorbimento del campione uno sia 0,3, il campione due è 1,0 e le norme sono: 0ppb di 2,243; 0.1ppb di 1,816; 0.3ppb di 1,415; 0.9ppb di 0,74; 2.7ppb di 0,313; 8.1ppb di 0,155. Poi la concentrazione del campione uno è nell'ordine di 2.7ppb ~ 8.1ppb; Il campione due è 0.3ppb ~ 0.9ppb. La gamma di concentrazione di Zearalenone nei campioni può essere ottenuta dal moltiplicato da per la diluizione corrispondente del campione.
7. analisi quantitativa 2
Per calcolare la concentrazione di campioni, una curva standard dovrebbe essere fatta. Prima che la curva standard sia fatta, il concetto di % di capacità di assorbimento dovrebbe essere di sapere.
Calcolo di % di capacità di assorbimento:

 

Percentuale di valore di capacità di assorbimento =	B	×100%
	B0

Valore del OD di media di B-the del campione o della soluzione tipo
Valore del OD di media di B0-the delle 0 soluzioni tipo di ng/ml
La norma zero così è resa uguale a 100% ed i valori di capacità di assorbimento sono citati nelle percentuali. I valori hanno calcolato per le norme sono inseriti in un sistema delle coordinate su carta millimetrata semilogarithmic contro la concentrazione di Zearalenone [ng/ml]. La concentrazione di Zearalenone in ng/ml che corrisponde alla capacità di assorbimento di ogni campione può essere letta dalla curva di calibratura.
Un software speciale per l'analisi di risultato dell'ELISA faciliterà le doppie o determinazioni multiple. Se avete bisogno di, chiami prego per richiedere.

8. Precauzioni

1. La temperatura ambiente inferiore a ℃ 25 o la temperatura dei reagenti e dei campioni che non sono rinviati alla temperatura ambiente (℃ 20-25) condurrà ad un valore standard più basso del OD.
2. la siccità del microplate nel processo di lavaggio sarà accompagnata dalle situazioni compreso le curve standard non lineari e la riproducibilità indesiderabile; Così continui al punto seguente subito dopo del lavaggio.
3. miscela anche prima dell'aggiunta dei qualsiasi reagenti.
4. La soluzione di arresto è la soluzione acida solforica da 2 m., evita contattare con la pelle.
5. Non usi il corredo che supera la sua data di scadenza. L'uso dei reagenti diluiti o adulterati dai corredi condurrà ai cambiamenti nella sensibilità e nei valori di rilevazione del OD. Non scambi i reagenti dai corredi dei numeri di lotto differenti per usare.
6. stoccaggio: deposito a ℃ 2-8, non congelato. Metta il microplate inutilizzato in una borsa di automatico-sigillamento per risigillarlo. La sostanza tipo ed il colore incolore precedenti è sensibili alla luce e non possono direttamente essere esposte così alla luce.
7. scarti la soluzione di colorazione con tutto il colore che indica la degenerazione di questa soluzione. Il valore di rilevazione (450/630nm) delle 0 soluzioni tipo (0 ppb) di meno di 0,5 ((A450nm<0> 8. La temperatura ottimale della reazione è ℃ 25 e troppo alto o ugualmente le basse temperature provocheranno i cambiamenti nella sensibilità di rilevazione e nei valori del OD.

9. Data di scadenza e di stoccaggio

Stoccaggio: deposito a ℃ 2-8, non congelato.
Data di scadenza: 12 mesi; la data di produzione è sulla scatola.
Nota: Se l'imballaggio sotto vuoto di microplate ha perdita, è ancora valido usare, non colpisce il risultato dei test, è di rilassarsi per usare.

 

 

 

 

 

 

 

Q1: Quando sarà spedito?
A1: Spediremo appena possibile le merci per voi entro 7 giorni lavorativi dopo la ricezione del pagamento. (Nel caso dei fattori esterni quale l'epidemia, la consegna può essere ritardata)

 

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